La sepsis neonatal asociada a la asistencia sanitaria por enterobacterias se ha incrementado mundialmente. Se realizó una investigación observacional descriptiva longitudinal prospectiva con el objetivo de describir el comportamiento de las enterobacterias en aislamientos de muestras de neonatos con IASS ingresados en el Servicio de Neonatología del Hospital Provincial de Sancti Spíritus, desde enero de 2023 hasta marzo de 2024. Se trabajó con 15 muestras que cumplieron los criterios de selección. La identificación de especie se realizó cumpliendo las normas de la especialidad, se utilizó el método de Kirby-Baüer siguiendo los lineamientos del Clinical and Laboratory Standards Institute y Laboratorio Nacional de Referencia para la Vigilancia de la Resistencia Antimicrobiana en Patógenos causantes de IAAS. La mayoría de la sepsis neonatal por enterobacterias fue tardía en pretérminos con bajo peso al nacer que usaron previamente antibióticos, siendo el germen predominante la Escherichia coli y la mayor sensibilidad fue a Meropenem con mayor resistencia a cefalosporinas y la mayoría eran productoras de BLEE.